基因操作技术
基因操作技术
3万+ 人选课
更新日期:2025/05/23
开课时间2025/01/21 - 2025/07/20
课程周期26 周
开课状态开课中
每周学时-
课程简介
《基因操作技术》课程依据生物制药技术专业典型任务“基因工程药品生产”工作领域设置,选择真实具体的职业活动“构建人干扰素α-2b工程菌”的工作项目为课程载体,课程内容以工作需要、学生的认知规律为依据,包括获得靶基因,制备载体,靶基因和表达载体的重组与转化筛选,诱导靶基因的表达与检测产物四个部分,主要工作任务包括提取脱氧核糖核酸、核糖核酸,并使用仪器设备扩增靶基因;进行酶切、胶回收、连接构建重组质粒;进行重组载体的转化和阳性克隆的筛选;进行工程菌的传代、保存。
课程大纲

在线教程

章节简介教学计划
课程绪论
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基因操作技术简介
基因操作技术课程导论
王贵霞
基因操作简史
王贵霞
基因工程的研究内容
张在国
基因概念的发展
张在国
基因组的结构
张在国
基因操作的工具酶
限制性核酸内切酶
王贵霞
DNA连接酶
王贵霞
DNA聚合酶
王贵霞
DNA修饰酶
王贵霞
基因工程制药
基因工程制药简介
王贵霞
几种基因工程药物
王贵霞
mRNA疫苗
刘恒
抗体偶联药物
刘恒
世界生物制药企业简介(1)
王贵霞
世界生物制药企业简介(2)
王贵霞
中国生物制药企业简介
王贵霞
中国药企的出海
王贵霞
中国创新药的出海
王贵霞
项目一 获得靶基因
学习资料
任务一 提取基因组DNA
基因组DNA的提取
刘恒
总RNA和mRNA的提取
刘恒
动物基因组DNA的提取
王贵霞
制备与检定DNA
王贵霞
任务二 扩增靶基因
微量移液器的使用
王贵霞
PCR仪的使用
王贵霞
PCR法扩增目的基因
王贵霞
聚合酶链式反应
王贵霞
化学法合成目的基因
王贵霞
基因组文库的构建
王贵霞
cDNA文库的构建
王贵霞
从基因文库中筛选分离目的基因
王贵霞
任务三 检测靶基因
琼脂糖凝胶电泳
王贵霞
学习资料
核酸样品纯度与浓度的测定
王贵霞
琼脂糖凝胶电泳理论
王贵霞
任务四 纯化靶基因
纯化DNA的方法和质量要求
刘恒
DNA片段的分离纯化
王贵霞
项目一 知识扩展
人类基因组计划
杨爽
基因组暗物质有什么用?
杨爽
人类是怎么从动物界脱颖而出的?
杨爽
基因与性格
杨爽
基因与亲密关系
杨爽
制备载体
学习资料
任务一 扩增培养载体菌种
质粒载体
王贵霞
噬菌体载体
王贵霞
人工染色体载体
王贵霞
柯斯质粒载体
张在国
单链DNA噬菌体克隆载体
张在国
表达载体构建原则
张在国
任务二 提取质粒载体
质粒提取
王贵霞
任务三酶切与纯化质粒载体
DNA的酶切反应
王贵霞
项目二 知识扩展
基因治疗常用的病毒载体
王贵霞
CAR-T细胞疗法
胡秋杰
基因编辑
胡秋杰
解读科普图书《自私的基因》
王贵霞
项目三 基因重组与转化筛选
学习资料
任务一 制备感受态细胞
感受态细胞的制备
王贵霞
受体细胞-基因表达的加工厂
王贵霞
任务二 DNA片段的连接
DNA片段的连接
刘恒
PCR产物与T载体的连接
王贵霞
任务三 重组质粒的转化
重组质粒的转化
王贵霞
重组基因如何进入受体细胞
王贵霞
任务四 筛选阳性克隆
双酶切鉴定重组子
王贵霞
菌落PCR鉴定重组子
王贵霞
目的基因成功进入受体细胞了吗
王贵霞
核酸探针
王贵霞
核酸杂交法筛选重组子
王贵霞
项目三 知识扩展
新冠病毒的核酸检测
于丹
基因检测与疾病预防
于丹
基因与遗传性疾病的治疗
胡秋杰
基因与癌症治疗
胡秋杰
解读科普图书《基因传》
王贵霞
项目四 靶基因的诱导表达和产物检测
学习资料
任务一 诱导靶基因的表达
大肠杆菌表达系统
于丹
芽孢杆菌表达系统
于丹
链霉菌表达系统
于丹
酵母表达系统
于丹
启动工程菌的表达工作
王贵霞
任务二 检测靶基因表达产物
组装SDS-PAGE电泳的模具
王贵霞
SDS-PAGE电泳试剂和制胶
王贵霞
蛋白质样品的制备与SDS-PAGE电泳
王贵霞
蛋白质的SDS-PAGE理论
王贵霞
外源基因转录产物的检测
王贵霞
外源基因表达产物的报告基因酶法检测
王贵霞
外源基因表达产物的免疫学与生物学活性检测
王贵霞
项目四 知识扩展
基因测序技术
张在国
基因芯片技术
张在国
分子标记技术
张在国
转基因生物技术
张在国
生物信息学
张在国
解读科普图书《端粒效应》
王贵霞
  • 绪章课程绪论

    简介基因操作技术课程主要内容,基因操作发展简史。常用的基因工程工具酶。基因工程制药的工艺和常用药物。

  • 0.1基因操作技术简介

    简介基因操作的基本过程和发展简史。

  • 0.2基因操作的工具酶

    介绍基因工程常用 的各种工具酶。

  • 0.3基因工程制药

    基因工程制药的工艺路线和常用的几种工程药物简介。

  • 第一章项目一 获得靶基因

    在本项目中,学习从血液样品中提取DNA基因组;PCR法扩增目的基因的原理、操作步骤和注意事项;琼脂糖凝胶电泳法检测DNA和胶回收DNA的方法。

  • 1.1任务一 提取基因组DNA

    从血液样品中提取检定DNA的方法。

  • 1.2任务二 扩增靶基因

    PCR法获得目的基因的原理、操作步骤、注意事项。简介化学合成法、基因文库法的原理。

  • 1.3任务三 检测靶基因

    琼脂糖凝胶电泳法检测DNA的原理、操作步骤和注意事项。

  • 1.4任务四 纯化靶基因

    应用试剂盒从琼脂糖凝胶中回收DNA的原理、方法与注意事项。

  • 1.5项目一 知识扩展

    人类基因组计划,基因组暗物质有什么用?人类是怎么从动物界脱颖而出的?基因与性格,基因与亲密关系

  • 第二章制备载体

    本项目学习扩增培养载体菌种,应用试剂盒提取质粒载体,双酶切质粒载体与试剂盒法回收纯化质粒载体。

  • 2.1任务一 扩增培养载体菌种

    常用的载体质粒、噬菌体和人工染色体简介。

  • 2.2任务二 提取质粒载体

    试剂盒法提取质粒的原理、操作步骤和注意事项。

  • 2.3任务三酶切与纯化质粒载体

    质粒载体的双酶切原理、方法与注意事项 。

  • 2.4项目二 知识扩展

    基因治疗常用的病毒载体,CAR-T细胞疗法,基因编辑,解读科普图书《自私的基因》

  • 第三章项目三 基因重组与转化筛选

    本项目学习应用氯化钙法制备感受态细胞,PCR产物DNA片段与T载体的连接;重组质粒的转化与筛选方法。

  • 3.1任务一 制备感受态细胞

    BL21大肠杆菌感受态细胞制备的原理、步骤与注意事项。常用的受体细胞简介。

  • 3.2任务二 DNA片段的连接

    PCR产物与T裁体的连接。

  • 3.3任务三 重组质粒的转化

    重组DNA的转化原理、方法与注意事项。转化与转导简介。

  • 3.4任务四 筛选阳性克隆

    筛选阳性重组 的常用 方法简介。

  • 3.5项目三 知识扩展

    新冠病毒的核酸检测,基因检测与疾病预防,基因与遗传性疾病的治疗,基因与癌症治疗,解读科普图书《基因传》

  • 第四章项目四 靶基因的诱导表达和产物检测

    本项目学习应用IPTG诱导工程菌的表达,SDS-PAGE检测靶基因表达产物。并介绍外源基因产物在转录水平和表达水平上的各种检测方法。

  • 4.1任务一 诱导靶基因的表达

    IPTG诱导工程菌表达的原理与方法。

  • 4.2任务二 检测靶基因表达产物

    检测蛋白质的SDS-PAGE原理、操作步骤和注意事项。外源基因在转录水平和表达水平的检测方法简介。

  • 4.3项目四 知识扩展

    基因测序技术,基因芯片技术,分子标记技术,转基因生物技术,生物信息学,解读科普图书《端粒效应》

  • 开始学习
  • 绪章  作业测试
    绪章课程绪论

    0.1 基因操作技术简介

    0.2 基因操作的工具酶

    0.3 基因工程制药

    视频数18
  • 第一章  作业测试
    第一章 项目一 获得靶基因

    1.1 任务一 提取基因组DNA

    1.2 任务二 扩增靶基因

    1.3 任务三 检测靶基因

    1.4 任务四 纯化靶基因

    1.5 项目一 知识扩展

    视频数22
  • 第二章  作业测试
    第二章 制备载体

    2.1 任务一 扩增培养载体菌种

    2.2 任务二 提取质粒载体

    2.3 任务三酶切与纯化质粒载体

    2.4 项目二 知识扩展

    视频数12
  • 第三章  作业测试
    第三章 项目三 基因重组与转化筛选

    3.1 任务一 制备感受态细胞

    3.2 任务二 DNA片段的连接

    3.3 任务三 重组质粒的转化

    3.4 任务四 筛选阳性克隆

    3.5 项目三 知识扩展

    视频数16
  • 第四章  作业测试
    第四章 项目四 靶基因的诱导表达和产物检测

    4.1 任务一 诱导靶基因的表达

    4.2 任务二 检测靶基因表达产物

    4.3 项目四 知识扩展

    视频数18
  • 期末考试