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绪章课程绪论
简介基因操作技术课程主要内容,基因操作发展简史。常用的基因工程工具酶。基因工程制药的工艺和常用药物。
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●0.1基因操作技术简介
简介基因操作的基本过程和发展简史。
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●0.2基因操作的工具酶
介绍基因工程常用 的各种工具酶。
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●0.3基因工程制药
基因工程制药的工艺路线和常用的几种工程药物简介。
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第一章项目一 获得靶基因
在本项目中,学习从血液样品中提取DNA基因组;PCR法扩增目的基因的原理、操作步骤和注意事项;琼脂糖凝胶电泳法检测DNA和胶回收DNA的方法。
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●1.1任务一 提取基因组DNA
从血液样品中提取检定DNA的方法。
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●1.2任务二 扩增靶基因
PCR法获得目的基因的原理、操作步骤、注意事项。简介化学合成法、基因文库法的原理。
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●1.3任务三 检测靶基因
琼脂糖凝胶电泳法检测DNA的原理、操作步骤和注意事项。
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●1.4任务四 纯化靶基因
应用试剂盒从琼脂糖凝胶中回收DNA的原理、方法与注意事项。
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●1.5项目一 知识扩展
人类基因组计划,基因组暗物质有什么用?人类是怎么从动物界脱颖而出的?基因与性格,基因与亲密关系
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第二章制备载体
本项目学习扩增培养载体菌种,应用试剂盒提取质粒载体,双酶切质粒载体与试剂盒法回收纯化质粒载体。
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●2.1任务一 扩增培养载体菌种
常用的载体质粒、噬菌体和人工染色体简介。
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●2.2任务二 提取质粒载体
试剂盒法提取质粒的原理、操作步骤和注意事项。
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●2.3任务三酶切与纯化质粒载体
质粒载体的双酶切原理、方法与注意事项 。
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●2.4项目二 知识扩展
基因治疗常用的病毒载体,CAR-T细胞疗法,基因编辑,解读科普图书《自私的基因》
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第三章项目三 基因重组与转化筛选
本项目学习应用氯化钙法制备感受态细胞,PCR产物DNA片段与T载体的连接;重组质粒的转化与筛选方法。
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●3.1任务一 制备感受态细胞
BL21大肠杆菌感受态细胞制备的原理、步骤与注意事项。常用的受体细胞简介。
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●3.2任务二 DNA片段的连接
PCR产物与T裁体的连接。
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●3.3任务三 重组质粒的转化
重组DNA的转化原理、方法与注意事项。转化与转导简介。
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●3.4任务四 筛选阳性克隆
筛选阳性重组 的常用 方法简介。
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●3.5项目三 知识扩展
新冠病毒的核酸检测,基因检测与疾病预防,基因与遗传性疾病的治疗,基因与癌症治疗,解读科普图书《基因传》
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第四章项目四 靶基因的诱导表达和产物检测
本项目学习应用IPTG诱导工程菌的表达,SDS-PAGE检测靶基因表达产物。并介绍外源基因产物在转录水平和表达水平上的各种检测方法。
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●4.1任务一 诱导靶基因的表达
IPTG诱导工程菌表达的原理与方法。
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●4.2任务二 检测靶基因表达产物
检测蛋白质的SDS-PAGE原理、操作步骤和注意事项。外源基因在转录水平和表达水平的检测方法简介。
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●4.3项目四 知识扩展
基因测序技术,基因芯片技术,分子标记技术,转基因生物技术,生物信息学,解读科普图书《端粒效应》